小鼠常用给药方法

 

一、腹腔注射（Intraperitoneal Injection,IP）
 

图源The Laboratory Mouse(Handbook of Experimental Animals)

 

操作步骤：

 

1.抓取小鼠：采用背侧保定法抓取小鼠，使其头部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住。

 

2.消毒：用75%酒精棉球消毒注射部位，通常选择下腹部腹中线两侧0.5cm处（与大腿根部平齐）。

 

3.进针：将注射器针头刺入皮肤，进入皮下后，沿皮下向前推进23mm，针头与皮肤呈45度角刺入小鼠腹腔。穿透腹膜后，针尖的阻力会消失。

 

4.回抽与注射：回抽针栓，如无回血或液体即可注入药物。

 

5.拔针：注射完毕后，轻轻旋转针头，再缓慢拔出注射器，以免液体外漏。

 

注意事项：

 

1）注射位置需准确，避免伤及脏器。保定小鼠时使其头部稍向后仰，可使下腹部脏器上移。

 

2）进针角度向下45°，而非水平或向上，否则容易打到皮下形成鼓包。

 

3）注射前需用酒精棉球擦拭小鼠皮肤，注射后观察小鼠是否有异常反应。

 

 

二、灌胃给药（Intragastrical Gavage,IG）

 

图源The Laboratory Mouse(Handbook of Experimental Animals)

 

操作步骤：

 

1.禁食：灌胃前将小鼠禁食48小时，避免胃内容物阻碍灌胃注射以及影响药物吸收速率。

 

2.固定小鼠：将小鼠固定成垂直体位，使其头、颈、身体成一条直线。右手拉住小鼠尾巴，左手的拇指、食指和中指揪住小鼠背部及颈部皮肤，小指和无名指压住小鼠的尾巴。

 

3.插针：右手持灌胃针，从一侧嘴角进针，轻压舌根，沿咽后壁徐徐插入食管。插入时应无阻力，若感到阻力或动物挣扎，应拔出重插。

 

4.注射药物：确认灌胃针位置无误后，缓慢注入药物。注射过程中观察小鼠是否有异常反应。

 

5.拔针：灌胃结束后轻柔地拔出灌胃针，观察是否有漏液并关注小鼠健康状态。

 

注意事项：

 

1）灌胃针的尖端有一个中空的金属球，目的是防止针头刺入气管或划伤消化道。

 

2）灌胃针插入深度需合适，一般插入小鼠34cm。

 

3)灌胃过程中要避免过快注射，以免引起小鼠呕吐。

 

三、皮下注射（Subcutaneous Injection,SQ）

 

图源The Laboratory Mouse(Handbook of

Experimental Animals)

 

操作步骤：

 

1.固定小鼠：用左手拇指和食指捏起小鼠背颈部皮肤，使其皮肤绷紧。

 

2.消毒：用75%酒精棉球消毒注射部位。

 

3.进针：右手持注射器，针头斜面朝上，与皮肤呈45度角刺入皮下。刺入后针头轻轻左右摆动，易摆动说明已刺入皮下。

 

4.注射药物：回抽无血液后，缓慢推注药物。注射部位会出现一个小包。

 

5.拔针：注射完毕后，拔出针头，用无菌棉签轻压针孔片刻，防止药物外漏。

 

注意事项：

 

1）皮下注射的吸收速率较慢，适用于对组织无刺激性的药物。

 

2）注射部位可选择颈背部、腋下或大腿内侧的皮肤。

 

3）注射剂量需控制在小鼠0.10.3ml/10g，大鼠小于1ml/100g。

 

四、尾静脉注射（Intravenous Injection,IV）

 

 

图源北京大学深圳研究生院实验动物中心

 

操作步骤：

 

1.固定小鼠：将小鼠放入固定器中，尾部自然外露。

 

2.准备血管：用4550℃的温水浸泡小鼠尾巴30秒，或用75%酒精棉球擦拭，使尾静脉充盈扩张。

 

3.进针：右手持注射器，针头斜面朝上，与尾部静脉平行，从尾部远端（尾尖方向）进针。针头刺入至少3mm后，轻推注射器，若无阻力，即可注射。

 

4.注射药物：缓慢注入药物，注射过程中观察小鼠是否有异常反应。

 

5.拔针：注射完毕后，用干棉球按压针孔片刻，防止出血。

 

注意事项：

 

1）小鼠尾部有三条静脉，两侧静脉较易固定，常用于注射。

 

2）注射时需避免刺入过深或刺破血管，导致药物外渗。

 

3）注射剂量一般为小鼠0.10.2ml/10g。

 

五、肌肉注射（Intramuscular Injection,IM）

 

图源The Laboratory Mouse(Handbook of

Experimental Animals)

 

操作步骤：

 

1.固定小鼠：一般在动物麻醉后进行，或者由两个人配合操作，一人固定小鼠，一人注射。

 

2.选择注射部位：通常选择后肢大腿内侧或外侧的肌肉。

 

3.消毒：用75%酒精棉球消毒注射部位。

 

4.进针：左手固定后肢，右手持针垂直进针，回抽，看是否有液体回流。若无液回流，可继续注射，轻推药物，匀速注射。

 

注意事项：

 

1）肌肉注射药物水溶液时吸收迅速，适用于油溶液和某些刺激性物质。

 

2）注射完成后，用手轻轻按摩注射部位周围的肌肉组织，促进药液吸收。

 

 

六、皮内注射（Intradermal Injection,ID）

 

图源The Laboratory Mouse(Handbook of

Experimental Animals)

 

操作步骤：

 

1.固定小鼠：用左手将小鼠背部皮肤捏起，形成皱褶。

 

2.消毒：用70%酒精棉球消毒注射部位。

 

3.进针：右手持注射器，针头斜面朝上，与皮肤呈30°角刺入表皮与真皮之间，之后几乎和皮肤平行的方向在皮下走行35mm，再稍刺入，注射药物。

 

4.观察：注射后可见皮肤表面呈现小丘疹状隆起，并呈苍白色，一段时间后可消失。

 

注意事项：

 

1）一般选择小鼠背部脊柱两侧皮肤进行注射。

 

2）注射体积不要超过50ul，两点间隔1cm以上，避免产生组织坏死。

 

3）不要回抽注射器。

如何选择合适给药方式

 

1.根据实验目的选择

 

•研究口服生物利用度：选择灌胃给药。

•研究腹腔给药生物利用度：选择腹腔注射。

•研究药物的急性毒性：可选择尾静脉注射或腹腔注射。

 

2.考虑药物性质

 

•刺激性小的水溶性药物：适合腹腔注射。

•不溶于水的药物：可选择肌肉注射。

•需要快速起效的药物：可选择尾静脉注射。

 

3.考虑动物的健康状态

 

•幼鼠或体弱小鼠：避免使用肌肉注射，以免损伤肌肉组织。

•需要长期给药的实验：可选择皮下注射或灌胃给药。

 

4.考虑操作的可行性

 

•技术难度较高的给药方式：如尾静脉注射，需要一定的操作技巧和经验。

•操作简便的给药方式：如灌胃给药，较为易操作。

 

注：

图源清华大学实验动物中心

 

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参考资料：

[1] https://www.larc.tsinghua.edu.cn/post/424

[2]南方医科大学爱课教学支持平台实验教学管理中心

[3]The Laboratory Mouse(Handbook of Experimental Animals)

[4]https://mp.weixin.qq.com/s/1O9Cjcw9DmhLrskxu0P6gQ

[5]https://mp.weixin.qq.com/s/audrVeCWsrszskJ4OQncDw

[6]https://mp.weixin.qq.com/s/jgqBZ_zw8QfQYwOVfU_Ifg

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